發(fā)酵罐是一種生化反應(yīng)設(shè)備,是發(fā)酵生產(chǎn)中必備的設(shè)備,發(fā)酵就是使微生物大量分泌抗菌素。發(fā)酵罐就是為菌種提供在適宜的溫度,適當(dāng)?shù)耐鈹嚢钘l件下,在液體培養(yǎng)基中大量繁殖及分泌抗菌素的設(shè)備。發(fā)酵罐被廣泛應(yīng)用于抗生素、氨基酸、檸檬酸等各個領(lǐng)域。發(fā)酵罐的型式有標(biāo)準(zhǔn)式、無機(jī)械攪拌式和自吸式3種,由于發(fā)酵的產(chǎn)品不同,菌種不同,所以發(fā)酵的工藝要求也不同。因此,發(fā)酵罐工藝設(shè)計也不同。
從防止發(fā)酵罐污染的角度考慮,整個發(fā)酵罐罐體應(yīng)保證無滲漏、積料、死角?,F(xiàn)代的生物制品發(fā)酵罐罐體大都采用316L不銹鋼制成,采用電拋光或化學(xué)拋光,有的發(fā)酵罐內(nèi)外都作了鏡面拋光,同制品接觸而的光潔度小于0.3μ。高光潔度使得罐體更容易清潔,減低了污染幾率。罐體小于10L的實驗規(guī)模發(fā)酵罐一般用硬質(zhì)化學(xué)玻璃制作,以適臺觀察。
為了獲得較好的攪拌混合和溶解氧(DO)的效果,用于培養(yǎng)細(xì)胞的罐體其高徑比(H/D,H為罐高,D為罐直徑)一般在2~3。在培養(yǎng)細(xì)菌時,由于細(xì)菌最終生長密度很大,為防止產(chǎn)生沉淀提高溶氧量,通常采用高轉(zhuǎn)速,高徑比2.5~3,罐體瘦長,由于攪拌速度較高,為防止形成漩渦,在罐體壁上常裝有檔板(buffer)。在培養(yǎng)動物細(xì)胞時,由于細(xì)胞對攪拌的剪切力敏感,攪拌速度一般較低,因此其高徑比一般采用1~1.5,以便增大氣液接觸面。
由于無菌培養(yǎng)的要求,50L以上的發(fā)酵罐一般都配有在位滅菌系統(tǒng)(SIP),所以發(fā)酵罐的罐體還需符合壓力容器的有關(guān)規(guī)定,如壁厚、材料、連接件、安全裝置等,發(fā)酵罐所使用的壓力表因需同制品接觸必須采用衛(wèi)生型隔膜式接頭。
在純蒸汽滅菌操作過程中,人員離罐體很近,必須具備可靠的安全裝置,一些發(fā)酵罐采用爆破片作為過壓保護(hù)裝置,安全可靠但價格高,一但過壓爆破只有更新。另一些發(fā)酵罐采用可復(fù)位的安全釋放閥,可重復(fù)使用但易污染系統(tǒng)。生產(chǎn)型的發(fā)酵罐系統(tǒng)應(yīng)考慮是否符臺生物制品工業(yè)大規(guī)模安全規(guī)范。
發(fā)酵罐攪拌系統(tǒng)
發(fā)酵罐的攪拌系統(tǒng)多種多樣,是各生產(chǎn)商努力研究的重點。首要作用是發(fā)酵液通過攪拌流動,增加氣液交換的機(jī)會以提高溶氧值,其次使發(fā)酵液充分混和,并使液體中的固形物料保持均勻的懸浮狀態(tài),有利于營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝物的分散。
各類發(fā)酵罐的攪拌側(cè)重不同,攪拌器可以使被攪拌的液體產(chǎn)生軸向流動和徑向流動,不同的葉槳所產(chǎn)生的液體流向差別很大。在培養(yǎng)微生物的發(fā)酵罐內(nèi)多采用圓盤渦輪攪拌器,它有平葉式、彎葉式和箭葉式三種,葉片數(shù)量一般為六個,少至三個,多至八個。
當(dāng)采用底部進(jìn)氣時,攪拌器打碎空氣氣泡,使大氣泡分散成較小的氣泡,增加氣一液接觸界面,以提高氧的傳質(zhì)速率。就粉碎氣泡的能力作比較,平葉攪拌器大于彎葉攪拌器,彎葉攪拌器大于箭葉攪拌器,但其翻動流體的能力則與上述情況相反。為了使發(fā)酵液充分地被攪動,根據(jù)發(fā)酵罐的容積,在同一攪拌軸上常配置多個攪拌葉槳,三層攪拌槳是常用的方法。
在培養(yǎng)細(xì)胞時,一般傾向于采用較大的傾斜槳葉攪拌器或船舶推進(jìn)槳式攪拌器,特別在采用微載體培養(yǎng)時更是如此,它可在較低的攪拌轉(zhuǎn)速下使載體懸浮。此類葉槳多采用三葉、45°傾角,它具有較好的使溶液上下翻動的能力。
近年的各類先進(jìn)發(fā)酵罐都安裝了磁偶臺直流電機(jī),采用磁偶臺使得罐體內(nèi)外沒有了直接的軸連接,進(jìn)一步減小了污染幾率。采用直流電機(jī),可以實現(xiàn)無級變速,這對于動物細(xì)胞的培養(yǎng)尤其重要,慢速的起停減小了對細(xì)胞的傷害。
對于一些較大的發(fā)酵罐系統(tǒng),由于功率需要,多采用變頻交流電機(jī)控制轉(zhuǎn)速。細(xì)菌培養(yǎng)罐轉(zhuǎn)速大多為50-1000rpm,細(xì)胞培養(yǎng)罐多為10-300rpm。大多數(shù)的發(fā)酵罐攪拌電機(jī)都安裝在罐體軸線上,位于頂部的居多,但由于攪拌電機(jī)和頂蓋的重量加大,必需增加一套頂蓋提升系統(tǒng),攪拌軸一般從罐頂伸人罐內(nèi),但對容積很大的大型發(fā)酵罐,也可采用下伸軸(即攪拌電機(jī)安裝于罐底),下伸軸式裝置可使發(fā)酵罐重心降低,軸的長度縮短,穩(wěn)定性提高。發(fā)酵罐操作面的傳動嗓音也可大為降低。而且罐頂空間可充分用來安裝其它部件。
一些中小型的發(fā)酵罐為了省去罐體頂蓋提升系統(tǒng)也采用了下伸軸,但是下伸軸的使用,對軸封的要求更為嚴(yán)格,不易清潔,檢修也增加了一些難度。有的發(fā)酵罐采用了偏心安裝轉(zhuǎn)軸(即葉輪不在罐體軸線上)的方式,可以有效地避免產(chǎn)生漩渦和底部沉積,但其缺點同前,而且不利于溶液的上下翻滾。
此外還有一類特殊的攪拌方式,它采用上下震動的方式來混臺溶液,多用于細(xì)菌培養(yǎng)發(fā)酵罐。